基于dCas9-VP64（经典CRISPRa）的sgRNA设计策略
dCas9-VP64是入门与快速验证CRISPRa思路的良好起点。遇到激活不理想时，可先从多sgRNA、验证TSS注释与检查染色质可及性入手；若仍不足，再考虑更强的激活器或不同Cas变体。把“定位精确”与“转录环境”两大维度同时纳入设计，会显著提升CRISPRa实验的成功率与可重复性。
dCas9-VP64是入门与快速验证CRISPRa思路的良好起点。遇到激活不理想时，可先从多sgRNA、验证TSS注释与检查染色质可及性入手；若仍不足，再考虑更强的激活器或不同Cas变体。把“定位精确”与“转录环境”两大维度同时纳入设计，会显著提升CRISPRa实验的成功率与可重复性。