总结

  CRISPR敲入技术凭借其精准性和灵活性,已成为基因功能解析与治疗开发的核心工具。通过优化修复模板设计、抑制NHEJ及增强HDR活性,研究人员能够实现从单碱基替换到数十kb大片段插入的多样化编辑。尽管仍面临细胞类型限制和效率瓶颈,随着新型编辑工具(如Prime Editing)和递送技术的进步,CRISPR敲入的应用前景将更加广阔,为精准医学和合成生物学开辟新的可能性。

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