基于dCas9-VP64(经典CRISPRa)的sgRNA设计策略
CRISPRa(CRISPR activation)是一类把CRISPR技术从基因敲断工具转成基因上调工具的策略。核心思想是用失活但能定位的dCas9把转录激活因子准确送到基因的启动子或其他调控元件上,从而增强目标基因的转录。dCas9-VP64是最常见的CRISPRa架构之一。利用sgRNA将dCas9-VP64复合物定位到目标基因附近,VP64招募转录共激活因子或转录起始复合体,从而提高启动子的活性,促成更多的转录起始事件。