相分离与肿瘤耐药研究新进展
新型筛选技术如DropScan通过计算机视觉分析凝聚体动态变化，加速了相分离调节剂的发现（Nature chemical biology, 2023）。该方法结合长时程成像与机器学习算法，可定量评估化合物对凝聚体溶解速率、液滴尺寸分布等参数的影响。例如，在针对FET-ETS融合蛋白的高通量筛选中，DropScan成功识别出能够改变凝聚体流变性的化合物，其中部分分子通过增强液滴表面张力诱导自发崩解（Nature chemical biology, 2023）。
药物分配调控是另一新兴方向。研究表明，小分子药物的理化性质（如疏水性、芳香环数量）决定其在特定凝聚体中的富集程度。例如，顺铂（cisplatin）在MED1凝聚体中的浓度较胞质高600倍，优先损伤超级增强子DNA，这种选择性分布可能部分解释其临床疗效（Science, 2020）。相反，他莫昔芬（tamoxifen）在MED1凝聚体中的过度富集导致ER受体浓度稀释，成为乳腺癌耐药的新机制（Molecular cell, 2020）。这些发现提示，优化药物的分配系数可能成为提升疗效的关键策略。
四、相分离与肿瘤微环境及表型可塑性
肿瘤微环境中的代谢压力通过相分离驱动适应性转录重编程。在肝癌前病变模型中，葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）表达下调导致糖原异常积累，形成液-液相分离液滴（Cell, 2021）。这些糖原凝聚体通过隔离Hippo激酶Mst1/2，解除其对YAP的抑制作用，促进恶性转化。值得注意的是，糖原相分离具有浓度依赖性：当肝细胞内糖原浓度超过300 mg/g时，液滴从动态液态向凝胶态转变，此时YAP信号持续激活且不可逆（Cell, 2021）。
在表型可塑性调控方面，相分离动态协调多条信号通路的交叉对话。例如，乳腺癌细胞在低黏附条件下，YAP凝聚体通过招募Wnt信号元件（如β-catenin）促进上皮-间质转化（EMT）（Molecular cell, 2021）。而在胰腺癌中，KRAS突变通过增强相分离相关蛋白（如NUAK1）的磷酸化修饰，驱动细胞在腺泡-导管化生与侵袭表型间切换（Protein Cell, 2024）。这种动态可塑性使肿瘤细胞能够快速适应治疗压力，形成异质性耐药克隆。
肿瘤代谢与相分离的交互作用亦值得关注。缺氧诱导因子HIF-1α通过相分离募集丙酮酸激酶M2（PKM2），形成代谢酶复合体凝聚体，促进糖酵解中间产物向丝氨酸合成通路分流（Protein Cell, 2024）。这种代谢重编程不仅支持肿瘤增殖，还通过产生抗氧化物质（如谷胱甘肽）减弱化疗药物的氧化损伤效应。
五、临床转化潜力与挑战
相分离研究为肿瘤耐药的临床管理提供了全新视角，但其临床应用仍面临多重挑战。从生物标志物开发角度看，致癌因子的相分离特征与患者预后显著相关。例如，在前列腺癌中，AR突变体形成的核凝聚体密度与血清PSA水平呈正相关，且恩杂鲁胺治疗耐药患者的肿瘤组织活检显示AR液滴尺寸较治疗前平均增加1.8倍（Nature chemical biology, 2022）。类似地，抗PD-1治疗耐药患者的肿瘤微环境中，YAP核凝聚体数量与CD8+ T细胞浸润负相关，其空间分布特征可通过多重荧光成像量化，为免疫治疗分层提供新指标（Molecular cell, 2021）。更有意义的是，相分离标志物具有动态响应特性：在乳腺癌新辅助化疗过程中，MED1凝聚体的溶解-重组装过程与病理完全缓解率显著相关，提示其可作为治疗响应的实时监测工具（Science, 2020）。
然而，靶向相分离的药物开发面临双重困境。首先是靶点选择性难题。生理性相分离（如应激颗粒、核仁组装）与病理性凝聚体的分子组成高度重叠。例如，EWS-FLI1融合蛋白的相分离依赖其N端IDR，而该区域与正常细胞中FUS蛋白的生理性液滴形成域同源（Nature chemical biology, 2023）。传统小分子抑制剂可能干扰基础细胞功能，导致严重脱靶效应。解决这一困境的策略包括开发构象特异性抗体：针对AR突变体凝聚体界面暴露的Tau5表位，已有单域抗体（nanobody）可在不影响野生型AR的情况下选择性溶解耐药突变体凝聚体（Nature chemical biology, 2022）。其次是动态调控的技术瓶颈。相分离具有瞬态可逆特性，而现有抑制剂多通过静态结合发挥作用，可能破坏液滴的动态平衡。光遗传学工具为此提供新思路——将CRY2olig光敏模块与QKI蛋白融合，可通过蓝光照射时空特异性地增强PABPN1相分离，从而逆转结直肠癌中的APA异常（Protein Cell, 2025）。
技术创新正在突破转化瓶颈。在检测手段方面，基于液滴流式分选（droplet FACS）的技术可定量分析单个肿瘤细胞的相分离特征，其灵敏度较传统免疫组化提升20倍（Protein Cell, 2025）。在药物递送领域，纳米载体被设计成"凝聚体导航器"：搭载ET516的脂质体表面修饰MED1结合肽，可优先富集至超级增强子凝聚体区域，使肿瘤组织药物浓度提升4倍而心脏毒性降低（Science, 2020）。更前沿的干预策略包括表观-相分离协同调控：将BET抑制剂JQ1与相分离破坏剂联用，可协同瓦解尤文肉瘤中EWS-FLI1凝聚体与染色质的相互作用，使肿瘤干细胞比例下降75%（Nature chemical biology, 2023）。